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抗凝機制,你真的了解嗎?

發表時間:2019-10-24

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抗凝管是為防止血液凝固,經過抗凝處理過的試管 ,不同顏色抗凝管含有不同的抗凝劑,代表不同的用途。實驗室中常用的抗凝劑有肝素、乙二胺四乙酸鹽(EDTA鹽)、枸櫞酸鹽、草酸鹽等4種。

 

肝素

 

        肝素廣泛在肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細胞和嗜堿性粒細胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團的黏多糖,平均分子量為15000(2000-40000)。

抗凝機制:

肝素是血液化學成分測定中最好的抗凝劑。其抗凝機制是與抗凝酶Ⅱ一起,在低濃度下抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用,并能加強抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶,從而阻止凝血酶形成;還有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。

肝素的鹽類有鈉、鋰、銨鹽。通常用肝素抗凝的劑量是10.0~12.5IU/mL血液。臨床常用肝素鋰,雖其價格較貴,但抗凝效果較好。

肝素對血液成分干擾較少,不影響紅細胞體積,不引起溶血,適用于做紅細胞滲透性試驗、血氣、血漿滲透量、紅細胞壓積及普通生化測定。但肝素具有抗凝血酶作用,不適合做血凝試驗。另外,肝素過量可引起白細胞聚集和血小板減少,所以不適合做白細胞分類和血小板計數,更不能用于止血檢驗。此外,肝素抗凝血不能用于制作血涂片,因為Wright染色后出現深藍色背景,影響顯微鏡減產。肝素抗凝血應于短時間內使用,否則放置過久血液又可凝固。

 

EDTA

         乙二胺四乙酸(EDTA)有二鈉、二鉀和三鉀鹽。EDTA鹽對紅、白細胞形態影響很小,血細胞計數用EDTA二鉀作抗凝劑。

抗凝機制:
EDTA是臨檢工作中最常用和最重要的抗凝劑和試劑之一,其機制是通過與水相中的鈣離子形成穩定的螯合物而阻止血液凝固。

EDTA抗凝劑不影響白細胞計數及大小,對紅細胞形態影響最小,并且可以抑制血小板的聚集,適用于一般血液學檢測。但如果抗凝劑濃度過高,滲透壓上升,會造成細胞皺縮。

EDTA的鹽類有鉀、鈉、鋰鹽,均溶于水,鉀鹽較鈉鹽的溶解度大,全血細胞計數最好使用EDTA的鉀鹽。

EDTA-K2可使 Ca2+、Mg2+下降,同時使肌酸激酶、堿性磷酸酶降低,EDTA-K2的最佳濃度為1.5mg/ml血液,如果血少,中性粒細胞會腫脹分葉消失,血小板會腫脹、崩解,產生正常血小板的碎片,使分析結果產生錯誤。

EDTA能影響某些酶的活性和抑制紅斑狼瘡因子,故不適于制作組化染色和檢查紅斑狼瘡細胞的血涂片。EDTA還會影響血小板聚集和白細胞吞噬功能,也不適于做止血學檢驗和血小板功能檢驗。

 

枸櫞酸鹽

        枸櫞酸鹽可與血中鈣離子形成可溶性螯合物,從而阻止血液凝固。枸櫞酸鈉有Na3C6H5O7·2H2O和Na3C6H5O7·5.5H2O等多種晶體。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l濃度),與血液按1:9或1:4比例使用。

抗凝機制:
枸櫞酸鹽主要是枸櫞酸鈉,其抗凝原理是能與血液中的Ca2+結合形成螯合物,使Ca2+失去凝血功能,凝血過程被阻斷,從而阻止血液凝固。

大部分凝血試驗都可用枸櫞酸鈉抗凝,它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的穩定,并且對平均血小板體積及其他凝血因子影響較小,可用于血小板功能分析。枸櫞酸鈉細胞毒性較小,也是輸血中血液保養液的成分之一。但是,枸櫞酸鈉6mg才能抗凝1ml血液,堿性強,不適用于血液化驗和生化測驗。

枸櫞酸鈉與血液按1:9使用。對于用于監測口服華法林等抗凝劑治療的患者,測定PT、APTT所用的枸櫞酸鈉濃度不應隨意改變,因為可能影響到國際標準化比值(INR)。

 

草酸鹽

 

       草酸鹽也是常用的抗凝劑,優點是溶解度大,常用的草酸鹽抗凝劑種類有草酸鈉、草酸鉀和草酸銨,草酸鈉的常用濃度為O.1 mol/L,與血液按1:9比例使用。

 

抗凝機制:

草酸鹽溶解后解離的草酸根與標本中的Ca2+形成草酸鈣沉淀,使Ca2+失去凝血功能,凝血過程被阻斷。

但是,高濃度k+或Na+易使血細胞脫水皺縮,而草酸銨則可使血細胞膨脹,故測定血細胞比容時用草酸銨與草酸鉀或草酸鈉兩者適當比例混合的抗凝劑,恰好不影響紅細胞的形態和體積。

可用于血液生化測定,但不適用于K+、Ca 2+的測定。由于生成草酸鈣沉淀,紅細胞會出現鋸齒狀,白細胞出現空泡,淋巴細胞及單核細胞會變形,不宜做血片檢查。草酸鹽可使血小板聚集,并影響白細胞形態,不能用于白細胞和血小板分類計數。

 

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